viernes, 2 de septiembre de 2011

Las gallinas deciden qué semen fecunda sus huevos

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Las gallinas tienen la capacidad de almacenar en su cloaca durante cierto tiempo (unas 3 semanas) el semen de todos los gallos con los que se han apareado, por lo que, a veces, es difícil saber la paternidad exacta si han pasado por el gallinero varios machos en intervalos cortos de tiempo.

Un reciente estudio revela que las gallinas, aunque promiscuas, son capaces de expulsar el semen de los gallos que no les parecen "atractivos".

El estudio "The Risk and Intensity of Sperm Ejection in Female Birds", realizado por Rebecca Dean, Shinichi Nakagawa y Tommaso Pizzari, aparece publicado en el número de Septiembre de 2011 de la revista "The American Naturalist" publicada por la Universidad de Chicago (USA).

Este nuevo estudio encontró que aunque las gallinas no son extremadamente delicadas con sus cópulas sí que lo son en referencia al esperma de qué gallo va a fecundar sus huevos. Las gallinas generalmente se aparean con múltiples machos, siendo conocido que, a veces, expulsan el esperma después de la cópula. Sin embargo no estaba claro si la eyección del esperma era una consecuencia de haber recibido una gran cantidad de eyaculado, o porque las gallinas están contínuamente intentando deshacerse del esperma indeseado.

Un equipo liderado por la investigadora de la Universidad de Oxford, Rebecca Dean, investigó el fenómeno en un grupo de pollos salvajes mantenidos en la Universidad de Estocolmo en Suecia. Tras controlar el volumen del eyaculado y otros factores, Dean y sus colegas encontraron que las gallinas expulsan una mayor cantidad de inseminaciones hechas por machos socialmente subordinados.

"Estos resultados muestran que las hembras promiscuas son capaces de sesgar activamente la utilización del esperma para ejercer una fuerte y predecible influencia en la lucha por la fertilización", comenta Dean. Con este hecho, las hembras "mantienen el control de la paternidad incluso en especies como los pollos donde los machos pueden forzar el apareamiento"


Foto: photograph by Tommaso Pizzari ©).




martes, 9 de agosto de 2011

Protocolo de extracción de ADN en Gallinas

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 Las aves, a diferencia de los mamíferos, tienen los glóbulos rojos con núcleo y, por lo tanto, con ADN. Además, su sangre coagula rápidamente.


Puede ser por estos dos motivos o por el segundo, que los kits comerciales para la extracción de ADN no funcionaron en la Gallina de Chulilla. Sin embargo, con un protocolo clásico de extracción de ADN, que ya se probó en anguilas, se consiguen resultados muy positivos en cuanto a concentración y calidad del ADN.


PROTOCOLO


1.- Preparar, por cada muestra de sangre, un tubo de 15 ml con 3 ml de Tampón de Lisis I
Para 100 ml de Tampón de Lisis I
-        Tris-HCL 0,1M pH 8,0: 10 ml de 1M
-        EDTA 0,1M pH 8,0: 20 ml de 0,5M
              Para 100 ml de EDTA 0,5 M pH 8,0:                       

                       18,62 g de EDTA (Ácido etilendiamintetraacético sódico, C10H14N2Na2O8Pm=336,21) 
                        2 g de Na OH.        
                        Disolver con agitador y ajustar pH a 8,0 y enrasar a 100 ml.
-        H2O mili-Q estéril: 70 ml


2.- Añadir 40 microlitros de sangre entera dentro del tubo y pipetear varias veces para limpiar el interior de la punta y obtener una suspensión homogénea.


3.- Añadir 3 ml de Tampón de Lisis II con mucho cuidado, dejándola resbalar por la pared del tubo. Cerrar con tapón e invertir 25 veces (sin prisas)

Para 100 ml de Tampón de Lisis II
-        Tris-HCL 0,1M pH 8,0 : 10 ml de 1M
-        EDTA 0,1M pH 8,0 : 20 ml de 0,5M
-    SDS al 1% : 10 ml al 10%
            Disolver 50 g de SDS (Dodecil Sulfato Sódico, CH3(CH2)11OSO3Na, Pm = 288,38) 
            en 400 ml de H2O bidestilada
            Ajustar el pH a 7,2. Enrasar a 500 ml
-        H2O mili-Q estéril : 60 ml

4.- Añadir 40 microlitros de Proteinasa K y 320 microlitros de solución de Precipitación. Cerrar el tapón, invertir 25 veces e incubar toda la noche a 55ºC.
Solución de Precipitación: solución saturada de NaCL (6M)
-  Cloruro sódico (NaCl, Pm = 54,44) : 100 g.
-  Agua bidestilada --> 200 ml.
-  Esterilizar en autoclave 
-o-o-o-o- incubar toda la noche -o-o-o-o-

5.- Añadir 1,6 ml de solución de precipitación y mezclar en vórtex durante 20 segundos (asegurarse de hacer un remolino en todo el tubo)


6.- Incubar en hielo durante 10 minutos (opcionalmente, mezclar por inversión 25 veces, ya que esta etapa es muy crítica para la precipitación de las proteínas)


7.- Centrifugar a 3000 rpm durante 30 minutos a 4ºC.


8.- Transferir el sobrenadante a un nuevo tubo de 15 ml. Centrifugar a 3000 rpm durante 15 minutos a 4ºC.


9.- Transferir el sobrenadante a un nuevo tubo de 15 ml y añadir 6 ml de Isopropanol (CH3CHOHCH3, Pm = 60,10). Invertir el tubo 25 veces e incubar a temperatura ambiente durante 10 minutos.
¡¡Momento mágico!!
En este paso, a la 3ª o 4ª vez de invertir el tubo, se aprecia la hebra de ADN... 
¡podrás observar una "maraña" blanca!


10.- Centrifugar a 3000 rpm durante 15 minutos a 4ºC. Eliminar el sobrenadante con cuidado de no perder el pellet.


11.- Añadir 10 ml de Etanol (CH3CH2OH, Pm = 46,07) al 70% a 0ºC. Invertir el tubo varias veces para lavar el pellet.


12.- Centrifugar a 3000 rpm durante 10 minutos a 4ºC y con mucho cuidado eliminar el sobrenadante. Colocar el tubo invertido en una posición inclinada sobre una toallita de papel absorbente hasta que se seque el pellet.


13.- Resuspender el pellet en 500 ml de TE y transferir a un eppendorf estéril
TE: Tampón de Elución. Para 500 ml de TE pH 8,0
-  Tris-HCl 0,1M pH 8,0 --> 5 ml.
-  EDTA 0,5M pH 8,0 --> 1 ml.
-  H2O bidestilada --> 494 ml.
-  Ajustar el pH y esterilizar en autoclave.


14.- Almacenar la solución de ADN a 4ºC

jueves, 17 de febrero de 2011

Servicio de Genotipado de Microsatélites

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Una de los requisitos que últimamente se solicitan para la presentación de las razas aviares (y de cualquier otra especie) al Comité de Razas del Ministerio de Medio Rural y Marino es el de presentar un estudio de microsatélites de ADN.

¿Qué puede obtenerse de un análisis de ADN?

1- Con un estudio genético de una raza aislada, simplemente se describe la variabilidad. Sin embargo, lo interesante es poder compararlas con otras razas y estimar árboles filogenéticos. Por ello es bueno contar con laboratorios que dispongas de datos (analizados por ellos mismos) de otras razas españolas.

2- Estimar apareamientos de mínimo parentesco: decidir qué animales están más alejados genéticamente para cruzarlos y evitar el deterioro de las razas (causa muy común en razas autóctonas en peligro)

3- Estimar si dos poblaciones son una única raza o se trata de dos razas diferenciadas genéticamente


4- Estimar si un individúo pertenece o no a una raza, determinar individuos cruzados.

5- Estudios de trazabilidad.

6- Pruebas de paternidad.

Este servicio lo ofrecen desde la Universidad Politécnica de Valencia, con personal cualificado y formado en centros de referencia Nacionales e Internacionales, donde ya se disponen de datos de Valenciana de Chulilla, Castellana Negra, Pita Pinta Asturiana además de otras 11 poblaciones europeas del proyecto AVIANDIV.
Este laboratorio dispone de primers de gallinas, ovino y conejo.

Persona de contacto
Amparo Grimal
http://www.amparogrimal.es
amgrimo@gmail.com

viernes, 4 de febrero de 2011

Fotos IV Exposición Avival

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Esta tarde se ha inaugurado la IV Exposición AVIVAL, con una novedad: hay un bar para tomar café, almorzar y hacerse una cervecita; eso sí la de los bunyols de carbassa no ha podido venir este año.

Os adelantamos unas fotos de lo que podréis ver mañana y pasado en la exposición, además sortean un viaje a Benidorm para dos personas con la entrada.

Conejo Leonado de Borgoña
Vista general. Palomas
Zona comercial
Zona comercial
Pollitos de Chulilla a la venta




miércoles, 26 de enero de 2011

IV Exposición Monserrat

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Pues un año más, y ya van 4, vuelve la exposición de Monserrat en Valencia.
Esta año viene cargada con muchos monográficos y con más ejemplares que en ediciones anteriores, pues además de la IV Exposición Avival, se celebran:


III Exposición Monográfica de la Gallina Valenciana de Chulilla. 
I Monográfico del Mediterráneo de la Gallina Empordanesa. 
I Monográfico del Mediterráneo de la Gallina Flor d'Armetller. 
I Monográfico del Mediterráneo de la Paloma Figurita. 
I Monográfico del Mediterráneo de la Paloma Carrier. 
I Monográfico del Mediterráneo de la Paloma Lahore. 
I Monográfico del Mediterráneo de la Paloma Buchón Granadino. 



El horario de asistencia será:
Viernes, 4 de febrero.
9:30-12:30. Visita colegios del término.
13:00. Inauguración oficial.
16:30-21:00. Entrada a socios y expositores.
Sábado, 5 de febrero.
9:30- 13:30 y 16:00 a 20:00. Abierto al público en general.
Domingo, 6 de febrero.
10:00-14:00. Abierto al público en general



¡¡Una buena oportunidad para adquirir ejemplares de Gallina Valenciana de Chulilla!!